(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210628964.5 (22)申请日 2022.06.06 (71)申请人 南京农业大 学 地址 211225 江苏省南京市溧水区白马镇 国家农业科技园南京农业大 学基地 (72)发明人 张瑞福　杨明珠　缪有志　张楠　 沈其荣　邵佳慧　李森　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 徐冬涛　李晓峰 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 11/12(2006.01) C05F 17/20(2020.01) C12R 1/38(2006.01)C12R 1/06(2006.01) (54)发明名称 一种低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂及 其制备方法和应用 (57)摘要 本发明提供了一种低温堆肥快速起爆复合 微生物菌剂及其制备方法和应用， 该复合微生物 菌剂中包含 边缘假单胞菌MP ‑1、 硬结节杆菌AS ‑3 和水稻节杆菌AO ‑4三株适冷型细菌。 本发明制备 的低温堆肥复合发酵菌剂可促进冬季低温堆肥 快速起爆， 解决冬季低温环境下堆肥启动困难， 农业固体废弃物大量堆积所造成的环境污染问 题。 在3～11℃的环境 建立堆肥试验， 接种IM复合 菌剂的堆体升温快， 在堆肥第2d达到高温期5 7.3 ℃， 0～5d平均升温速度为14.4℃/d， 堆肥第35d 时接菌处理的GI值已经达 到93.4％。 权利要求书1页 说明书6页 附图7页 CN 114958672 A 2022.08.30 CN 114958672 A 1.一种低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂， 其特征在于， 该复合微生物菌剂中包含边 缘假单胞菌(Pseudo monas marginalis)MP ‑1、 硬结节杆菌(Arthrobacter  scleromae)AS‑3 和水稻节杆菌(A rthrobacter  oryzae)AO ‑4三株适冷型细菌 。 2.根据权利要求1所述的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂， 其特征在于， 所述的复合 微生物菌剂是分别取有效活菌数≥1 ×109cfu/mL的边缘假单胞菌MP ‑1种子液、 硬结节杆菌 AS‑3种子液以及水稻节杆菌AO ‑4种子液按体积比(1～5)： (0.5～3)： (0.5～3)混合并发酵 培养后得复合发酵 液， 再采用吸附载体将所 得到的复合发酵 液充分吸附得到的。 3.根据权利要求2所述的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂， 其特征在于， 所述边缘假 单胞菌MP ‑1种子液、 硬结节杆菌AS ‑3种子液以及水稻节杆菌AO ‑4种子液的体积比为(1～ 3)： (0.5～ 2)： (0.5～ 2)； 最优选为2:1:1。 4.根据权利要求2所述的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂， 其特征在于， 吸附时， 所 述复合发酵 液与吸附载体的体积质量比为(1～5)： 1。 5.根据权利要求2或4所述的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂， 其特征在于， 所述的 吸附载体为 秸秆粉末。 6.权利要求1所述低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 分别取 有效活菌数≥1 ×109cfu/mL的边缘假单胞菌MP ‑1种子液、 硬结节杆菌AS ‑3种子液以及水稻 节杆菌AO ‑4种子液按体积比(1～5)： (0.5～3)： (0.5～3)混合并发酵培养后得复合发酵液， 再采用吸附载体将所 得到的复合发酵 液充分吸附得到低温堆肥 快速起爆复合 微生物菌剂。 7.权利要求1～5中任意一项所述的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂在低温堆肥中 的应用。 8.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂 在3～11℃的冬季能够快速启动堆肥。 9.一种农业固体废弃物低温堆肥的方法， 其特征在于， 权利要求1～5中任意一项所述 的低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂在3～11℃低温环境中对农业固体废弃物进 行低温堆 肥。 10.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 所述的农业固体废弃物为鸡粪、 中药渣、 茶粕和秸秆中的任意 一种或至少两种的混合。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958672 A 2一种低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明属于复合微生物菌剂技术领域， 具体涉及 一种低温堆肥快速起爆复合微生 物菌剂及其制备 方法和在低温堆肥中的应用。 背景技术 [0002]随着农业集约化的发展， 我国 已经成为农业废弃物产量最多的国家， 年产量高达 50亿t， 导致环境污染问题日益突出。 好氧堆肥是资源化利用农业废弃物的有效手段， 在解 决农业固体废弃物污染问题的同时还能利用废弃物中的营养成分转化为有机肥产品， 实现 资源化再利用。 [0003]堆肥易受低温环境影响， 当环境温度低于20℃时， 堆肥需要经历一个从低温到20 ℃的起爆阶段， 这一 阶段对于微生物的大量繁殖和堆肥进程的启动具有重要意义。 我国高 纬度地区(华北北部、 东北北部以及西北北部等)或者大部分地区的秋冬季节， 低 温时间持 续长达4‑6个月， 导致了堆肥反应起爆困难， 周期延 长， 病原菌难以有效杀灭等问题， 造成农 业固体废弃物在冬季 大量堆积， 同时也 严重限制了堆肥技 术的应用推广。 [0004]生活在低温环境中的微生物在长期进化过程中， 形成了独特适冷机制， 在寒冷环 境中具有顽强的生命活力， 所产的酶在低 温下有着较高的催化活性； 适冷菌及其分泌物在 食品、 医疗、 卫生领域已经有着重要的应用。 迄今为止， 关于堆肥微生物菌剂的研究大多集 中于常温和高温微生物， 针对低温微生物应用研究报导相对较少； 在仅有的低 温堆肥研究 中大多聚焦于低 温纤维素菌的筛选应用， 对堆肥初期蛋白、 淀粉等小分子碳氮源分解功 能 菌的研究应用几乎没有。 然而， 堆肥过程中木质纤维素等物质主要在高温期 被降解利用， 此 时接种的低温微 生物大多已经因高温而休眠甚至失活。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂及其制备方法和 应用。 本发明的复合微生物菌剂利用其在低温环 境中良好的生物活性代谢产热使堆肥快速 升温以解决现有的微生物菌剂在冬季应用效果差， 堆肥起爆困难、 周期长、 高温期短的技术 问题。 [0006]本发明的目的可以通过以下技 术方案实现： [0007]一种低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂， 该复合微生物菌剂中包含边缘假单胞菌 (Pseudomonas marginali s)MP‑1、 硬结节杆菌(Art hrobacter  scleromae)AS ‑3和水稻节杆 菌(Arthrobacter  oryzae)AO ‑4三株适冷型细菌。 各菌株购买自中国典型培养物保藏中心 (CCTCC)， 边缘假单胞菌MP ‑1， 保藏号： CCTCC  S2016797； 硬结节杆菌AS ‑3， 保藏号： CCTCC   S2016745； 水稻节秆菌AO ‑4， 保藏号： CCTCC S2016808。 [0008]作为一种优选技术方案， 所述的复合微生物菌剂是分别取有效活菌数≥1 × 109cfu/mL的边缘假单胞菌MP ‑1种子液、 硬结节杆菌AS ‑3种子液以及水稻节杆菌AO ‑4种子 液按体积比(1～5)： (0.5～3)： (0.5～3)混合并发酵培养后得复合发酵液， 再采用吸附载体说　明　书 1/6 页 3 CN 114958672 A 3