(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210577794.2 (22)申请日 2022.05.25 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.15530 2018.0 3.30 (71)申请人 中国农业科 学院农业资源与农业区 划研究所 地址 100081 北京市海淀区中关村南大街 12号 (72)发明人 张桂山　龚旗　张晓霞　汪博　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 张梦泽 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C07D 487/04(2006.01) C07C 39/11(2006.01)C07C 37/82(2006.01) C07C 67/56(2006.01) C07C 69/16(2006.01) A01N 63/20(2020.01) A01N 43/90(2006.01) A01N 37/02(2006.01) A01N 31/08(2006.01) A01P 21/00(2006.01) C12R 1/41(2006.01) (54)发明名称 栖稻根瘤菌在提高植物耐盐性中的应用 (57)摘要 本发明属于微生物菌肥技术领域， 具体涉及 一种耐盐菌剂及其在提高植物耐盐性中的应用。 所述耐盐菌剂包括栖稻根瘤菌M15的菌体、 菌悬 液、 发酵液、 发酵液粗提物和发酵液粗提物的单 体化合物中的一种或多种。 在盐胁迫条件下， 所 述栖稻根瘤菌M15可降低包括水稻在内的植物的 相对导电率、 脯氨酸含量、 Na+含量以及Na+/K+比 值， 提高植物中还原型谷胱甘肽和抗氧化酶的活 性， 进而缓解盐胁迫对植物的危害， 促进植物的 生长。 权利要求书1页 说明书11页 附图7页 CN 114921373 A 2022.08.19 CN 114921373 A 1.一种耐盐菌剂， 其特 征在于， 所述耐盐菌剂包括下述 Ⅰ ‑Ⅴ中的一种或多种： Ⅰ： 栖稻根瘤菌(Rhizobium  oryzihabitans)M15 菌体； Ⅱ： 栖稻根瘤菌 M15的菌悬 液； Ⅲ： 栖稻根瘤菌 M15的发酵 液； Ⅳ： 栖稻根瘤菌 M15的发酵 液粗提物； Ⅴ： 分离自栖稻根瘤菌 M15的发酵 液粗提物中的单体化 合物； 所述栖稻根瘤菌 M15的保藏编号 为CGMCC No.15530。 2.根据权利要求1所述的耐盐菌剂， 其特征在于， 所述栖稻根瘤菌M15的发酵液粗提物 包括栖稻根瘤菌M15发酵液 的乙酸乙酯相粗提物、 正丁醇相粗提物和水相粗提物中的一种 或多种。 3.根据权利要求1所述的耐盐菌剂， 其特征在于， 所述栖稻根瘤菌M15发酵液粗提物 的 单体化合物从栖稻根瘤菌 M15发酵液的水相粗 提物中分离得到 。 4.根据权利要求3所述的耐盐菌剂， 其特征在于， 所述栖稻根瘤菌M15发酵液粗提物 的 单体化合物包括环 ‑(L‑脯氨酸‑L‑酪氨酸)、 环‑(L‑脯氨酸‑L‑苯丙氨酸)、 环 ‑(S‑脯氨酸‑S‑ 异亮氨酸)、 环‑(R‑脯氨酸‑R‑亮氨酸)、 环 ‑(S‑脯氨酸‑R‑缬氨酸)、 酪醇和2 ‑(4‑乙酰氧基苯 基)乙醇中的一种或多种。 5.根据权利要求1所述的耐盐菌剂， 其特征在于， 当所述耐盐菌剂中包含栖稻根瘤菌 M15菌体时， 所述耐盐菌剂中栖稻根瘤菌 M15的浓度为(0.5～3) ×108CFU/mL。 6.根据权利要求1所述的耐盐菌剂， 其特征在于， 当所述耐盐菌剂中包含栖稻根瘤菌 M15的发酵液、 栖稻根瘤菌M15的发酵液粗提物和栖稻根瘤菌M15的发酵液粗提物的单体化 合物的任意一种或多种 时， 所述栖稻根瘤菌M15的发酵液中所述栖稻根瘤菌M15的浓度为 (0.5～3) ×108CFU/mL。 7.一种分离自栖稻 根瘤菌M15发酵液的水相粗提物， 其特征在于， 包括： 环 ‑(L‑脯氨酸‑ L‑酪氨酸)、 环 ‑(L‑脯氨酸‑L‑苯丙氨酸)、 环 ‑(S‑脯氨酸‑S‑异亮氨酸)、 环 ‑(R‑脯氨酸‑R‑亮 氨酸)、 环 ‑(S‑脯氨酸‑R‑缬氨酸)、 酪醇和2 ‑(4‑乙酰氧基苯基)乙醇中的一种或多种。 8.一种耐盐组合物， 其特 征在于， 包括权利要求7 所述单体化 合物中的一种或多种。 9.权利要求1～6任一项所述的耐盐菌剂、 权利要求7所述的水相粗提物或权利要求8所 述的耐盐组合物在提高植物耐盐性和/或制备植物耐盐产品中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特 征在于， 所述 植物包括水稻。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114921373 A 2栖稻根瘤菌在提高植物耐盐性中的应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物菌肥技术领域， 具体涉及栖稻根瘤菌在提高植物耐盐性中的应 用。 背景技术 [0002]水稻(Oryza  sativa L.)是世界上50％以上人口的主食， 主要分布在亚洲、 拉丁美 洲和非洲， 90％的水稻在亚洲种 植， 其中我国占1/3。 随着气候变化， 导致土壤盐碱度增加， 土壤盐渍化严重影响农业生产和生态环境， 造成植物生理干旱和养分吸收不平衡。 盐胁迫 是制约粮食生产的主要非生物胁迫之一。 与其他粮食作物相比， 水稻对田间盐分更为敏感， 当土壤含量超过6dS/m时， 会使水稻减产5 0％以上， 土壤盐化 严重影响水稻产量。 [0003]伴随工业化进程， 盐化土壤逐渐增多， 传统盐碱地开发利用以盐碱地改良为主， 综 合运用物理、 水利、 化学等措施降低土壤中盐浓度， 改良盐碱地使之适应作物生长。 盐碱地 改良耗费大量人力物力财力、 不易大面积推广。 水稻作为主要粮食作物和盐碱地改良的先 锋作物， 在淡水资源充足条件下， 种植水稻是改良利用盐碱地的最 好措施。 [0004]植物根际促生菌(PGPR)能够提高水稻耐盐能力， 具有环保、 经济、 可持续等优点， 是耐盐作 物选育的重要补 充手段。 研究和开 发缓解水稻盐胁迫的PGPR创制耐盐碱水稻具有 重要意义。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供栖稻根瘤菌在提高植物耐盐性中的应用， 所述耐盐菌剂包 括栖稻根瘤菌 M15及其活性物质， 可以显著缓解盐胁迫对植物的危害， 促进植物生长 。 [0006]本发明提供了一种耐盐菌剂， 所述耐盐菌剂包括下述 Ⅰ ‑Ⅴ中的一种或多种： [0007]Ⅰ： 栖稻根瘤菌 M15菌体； [0008]Ⅱ： 栖稻根瘤菌 M15的菌悬 液； [0009]Ⅲ： 栖稻根瘤菌 M15的发酵 液； [0010]Ⅳ： 栖稻根瘤菌 M15的发酵 液粗提物； [0011]Ⅴ： 分离自栖稻根瘤菌 M15的发酵 液粗提物中的单体化 合物； [0012]所述栖稻根瘤菌 M15的保藏编号 为CGMCC No.15530。 [0013]优选的， 所述栖稻根瘤菌M 15的发酵液粗提物包括栖稻根瘤菌M15 发酵液的乙酸乙 酯相粗提物、 正丁醇相粗 提物和水相粗 提物中的一种或多种。 [0014]优选的， 所述栖稻根瘤菌M 15发酵液粗提物的单体化合物从栖稻根瘤菌M 15发酵液 的水相粗 提物中分离得到 。 [0015]优选的， 所述栖稻根瘤菌M 15发酵液粗提物的单体化合物包括环 ‑(L‑脯氨酸‑L‑酪 氨酸)、 环 ‑(L‑脯氨酸‑L‑苯丙氨酸)、 环 ‑(S‑脯氨酸‑S‑异亮氨酸)、 环 ‑(R‑脯氨酸‑R‑亮氨 酸)、 环‑(S‑脯氨酸‑R‑缬氨酸)、 酪醇和2 ‑(4‑乙酰氧基苯基)乙醇中的一种或多种。 [0016]优选的， 当所述耐盐菌剂中包含栖稻根瘤菌M15菌体时， 所述栖稻根瘤菌M15的浓说　明　书 1/11 页 3 CN 114921373 A 3