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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210694059.X (22)申请日 2022.06.20 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114774334 A (43)申请公布日 2022.07.22 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO: M 202 2395 202 2.04.08 (73)专利权人 中国水产科 学研究院黄海水产研 究所 地址 266071 山东省青岛市 市南区南京路 106号 (72)发明人 郝建华 王伟 孙晶晶  (74)专利代理 机构 北京科家知识产权代理事务 所(普通合伙) 11427 专利代理师 杜娇 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 9/10(2006.01) C12P 17/04(2006.01) C12R 1/01(2006.01)(56)对比文件 CN 10723 6696 A,2017.10.10 CN 113564079 A,2021.10.2 9 Zhang, LM 等.Microbacterium mari num sp nov., iso lated from de ep-sea water. 《SYSTEMATIC AND AP PLIED MICROBIOLO GY》 .2012,摘要. 何聪芬 等.两种耐热磷酸 化酶的构建及高 效催化合成红景天苷. 《现代生物医学进 展》 .2019,1801. 杨林莉 等.蔗糖磷酸 化酶的研究进 展. 《微 生物学通报》 .2021,4904-4917. Yuanyuan Xia 等.Devel opment of   thermostable sucrose phosphorylase by   semi‑rational design for  efficient biosynthesis of  alpha‑D‑glucosylglycero l. 《Applied Microbi ology and Bi otechnology》 .2021,73 09-7319. 陈显玲 等.蔗糖磷酸 化酶产生菌的筛 选及 其催化合成a-熊果苷条件 优化. 《中国酿造》 .2022,117. 审查员 徐俊 (54)发明名称 深海微杆菌SUC7及其产生的蔗糖磷酸化酶 和应用 (57)摘要 本发明涉及一种深海微杆菌SUC7及其产生 的蔗糖磷酸化酶和应用, 属于微生物领域, 所述 微杆菌 (Microbacterium  sp.) SUC7, 保藏号为 CCTCC NO: M 2022395。 本发明还公开了利用所述 深海微杆菌S UC7发酵产生的蔗糖磷酸化酶。 所述 蔗糖磷酸化酶能够以蔗糖和对苯二酚为底物, 于 30‑50°C下充分避 光反应24‑48h, 得到α ‑熊果苷 反应液, 其产量可达 到33.2g/L。 权利要求书1页 说明书4页 序列表2页 附图3页 CN 114774334 B 2022.09.02 CN 114774334 B 1.一种深海微杆菌SUC7, 微杆菌的拉丁文为 Microbacterium  sp., 其特征在于, 所述深 海微杆菌SUC7的保藏 号为CCTCC NO: M 2022395。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114774334 B 2深海微杆菌SUC7及其产生的蔗糖磷酸化酶和应用 技术领域 [0001]本发明涉及一种深海微杆菌SUC7及其产生的蔗糖磷酸化酶和应用, 属于海洋微生 物技术领域。 背景技术 [0002]具有美白及保湿功效的抗坏血酸葡糖苷 (AA ‑2G) 、 熊果苷 (Arbutin) 和甘油葡糖苷 (2‑α‑GG) 价格昂贵, 一般添加于高档化妆品中, 限制了其广泛的应用。 传统的制备方法集中 于化学合成和天然 材料提取, 其中提取法因原材料的 限制, 难以可持续 发展和降低成本; 化 学合成虽然生产效率高, 但容易引入一些化学异构成分和有机溶剂等杂质, 造成其后续纯 化工艺复杂, 提高了其生产成本。 随着酶学和合成生物学的发展, 通过蔗糖磷酸化酶酶法转 化生产成为一条可持续、 绿色的制备工艺。 酶法转化具有反应条件温和、 不会出现异构成分 和引入有机溶剂等杂质的优点, 因此越来越受到 重视。 [0003]海洋微生物因其生活环境的独特性及环境适应性, 故作为产酶微生物资源具有显 著的优势: 耐压, 耐碱, 耐盐, 耐冷, 物种多样性, 代谢易调控, 低温下有较高活性等特性, 赋 予海洋微生物酶广泛的应用前景。 因此从海洋环境筛选高产蔗糖磷酸化酶的菌株, 是今后 研究和开发新型蔗糖磷酸 化酶的关键 。 发明内容 [0004]本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足, 提供一种新的能产蔗糖磷酸 化酶的来自海洋的微杆菌SUC7。 [0005]本发明要提供的另一个技术问题是提供上述来自海洋的微杆菌SUC7产的蔗糖磷 酸化酶的方法和应用。 [0006]本发明是通过如下技 术方案来实现的: [0007]一种深海微杆菌 (Microbacterium  sp.) SUC7, 其菌株保藏号为CCTCC  NO: M  2022395。 [0008]本发明所涉及的菌株SUC7是来自马里亚纳海沟深海沉积物中分离筛选到 的微杆 菌属SUC7 (Microbacterium  sp.SUC7) , 该菌株已于2 022年4月8日保藏在中国典型培养物保 藏中心, 保藏 地址为: 中国湖北省武汉市武昌区八一路2 99号, 电话: (027) ‑6875 2319。 [0009]本发明还公开了利用所述微杆菌 ( Microbacterium sp.) SUC7产生的蔗糖磷酸化 酶。 [0010]本发明还提供所述蔗糖磷酸化酶的制备方法, 所述方法为接微杆菌SUC7到液体种 子培养基(pH=7.0)中, 在20 ‑25℃、 摇床恒温培养18 ‑24h后, 取培养液按照接种量体积比5 ‑ 10%接入液体发酵培养基中, 摇床恒温20 ‑25℃培养24 ‑48h, 离心收集菌体, 重悬后破碎菌 体, 离心得到上清液即为蔗糖磷酸 化酶粗酶液。 [0011]进一步, 所述液体种子培养基配方为: 牛脑12.5g、 牛心浸出汁5.0g、 蛋白胨10.0g、 葡萄糖2.0g、 氯化钠5.0g、 磷酸氢二钠2.5g、 蒸馏水1000ml、 pH  6.8‑7.2。 液体发酵培养基的说 明 书 1/4 页 3 CN 114774334 B 3

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