(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210741362.0 (22)申请日 2022.06.27 (71)申请人 华新水泥股份有限公司 地址 435000 湖北省黄石市黄石大道897号 申请人 华新环境工程有限公司 (72)发明人 李叶青　王加军　李成国　刘震东　 魏茂　 (74)专利代理 机构 湖北武汉 永嘉专利代理有限 公司 42102 专利代理师 朱宏伟 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C12N 9/26(2006.01)C12N 9/42(2006.01) C12N 9/20(2006.01) C12N 9/50(2006.01) B01D 53/84(2006.01) B01D 53/48(2006.01) B01D 53/52(2006.01) B01D 53/58(2006.01) B01D 53/44(2006.01) C12R 1/225(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/465(2006.01) C12R 1/645(2006.01) C12R 1/72(2006.01) C12R 1/845(2006.01) C12R 1/885(2006.01) (54)发明名称 生活垃圾除臭用复合生物制剂及其制备方 法 (57)摘要 本发明涉及一种生活垃圾除臭用复合生物 制剂及其制备方法， 该复合生物制剂由复合乳酸 菌、 复合酵母菌、 复合放线菌和 复合霉菌分别纯 种扩大培养、 混合制备复合微生物发酵液， 再将 由纤维素酶、 蛋白酶、 脂肪酶和淀粉酶组成的复 合酶与复合微生物发酵液混合， 最后再与植物精 油和增溶剂按照特定比例混合进行制备。 按照此 方法制备的复合生物制剂可以有效的去除生活 垃圾在收集、 转运、 存储和处理过程中产生的臭 味， 而且安全可靠、 绿 色环保。 权利要求书2页 说明书10页 CN 115181697 A 2022.10.14 CN 115181697 A 1.一种生活垃圾除臭用复合生物制剂， 其特征在于， 按质量份数计包括以下组分： 复合 微生物发酵 液95.5～ 98.9份、 复合酶0.1～0.5份、 植物 精油0.5～ 2份、 增溶剂0.5～ 2份； 复合微生物发酵液按质量份数计包括以下组分： 复合乳酸菌发酵液55～70份， 复合酵 母菌发酵 液10～15份， 复合 放线菌发酵 液10～15份， 复合霉菌发酵 液10～15份的重量比； 所述复合酶按质量份数计包括以下组分： 纤维素酶20～30份、 蛋白酶10～20份、 脂肪酶 20～30份， 淀粉酶20～5 0份。 2.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述复合乳酸菌 发酵液采用植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和发酵乳杆菌按以下步骤进行培 养： ①固体平板活化： 分别将植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和发酵乳杆菌菌种在MRS固体培养 基上划线活化， 温度3 5～37℃活化培 养48～72h； ②制备一级种子液： 分别从活化平板上挑取单菌落接入到MRS液体培养基中35～37℃ 振荡培养48～72h， 获得植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和发酵乳杆菌一级种子液； ③将植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和发酵乳杆菌一级种子液分别接入到发酵培养基中， 发酵条件为： 温度35～ 37℃， pH7.0 ±0.2， 搅拌转速100～12 0r/min， 培养时间60～72h， 且当 发酵液pH低于4时， 发酵 结束； ④将植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和发酵乳杆菌发酵液按照1～3:1～3:1～3进行混合， 即获得复合乳酸菌发酵 液。 3.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述复合酵母菌 发酵液采用克鲁斯 假丝酵母、 季也 蒙假丝酵母和异常威克汉姆酵母按以下步骤进行培 养： ①固体平板活化： 分别将植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和 发酵乳杆菌菌种在5 °Bé麦芽汁 固体培养基上划线活化， 温度28～3 0℃活化培 养48～72h； ②制备一级种子液： 分别从活化平板上挑取单菌落接入到5 °Bé麦芽汁液体培养基中28 ～30℃振荡培 养48～72h， 获得植物乳杆菌、 类干酪乳杆菌和发酵乳杆菌一级种子液； ③将克鲁斯假丝酵母、 季也蒙假丝酵母和 异常威克汉姆酵母一级种子液分别 接入到发 酵培养基中， 发酵条件为： 温度28～30℃， pH6.8 ±0.2， 搅拌转速150～200r/min， 培养时间 36～48h， 发酵 结束； ④将克鲁斯假丝酵母、 季也蒙假丝酵母和异常威克汉姆酵母发酵液按照1～3:1～3:1 ～3进行混合， 即获得复合酵母菌发酵 液。 4.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述复合放线菌 发酵液采用链霉菌属 和可可链霉菌可 可亚种按以下步骤进行培 养： ①固体平板活化： 取出链霉菌属保藏管， 用高氏一号琼脂培养基划平板进行活化， 40～ 50℃培养4～7d； 取出可可链霉菌可可亚种保藏管， 用营养肉汁琼脂培养基划平板进行活 化， 35～37℃， 培 养5～7天； ②制备一级种子液： 从高氏一号固体培养基上挑取适量单菌落接入到 高氏一号液体培 养基中， 40～50℃振 荡培养3～5天， 获得链霉菌属一级种子液； 从营养肉汁固体培养基上挑 取适量菌落接入到营养肉汁液体培养基中， 35～37℃振荡培养3～5天， 获得可可链霉菌可 可亚种一级种子液； ③将链霉菌属和可可链霉菌可可亚种一级种子液分别接入到发酵培养基中， 链霉菌属 发酵条件为： 温度45～50℃， pH7.2～7.4， 搅拌转速140～160r/min， 培养时间7 天； 可可链霉权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115181697 A 2菌可可亚种发酵条件为： 温度35～37℃， pH7.2～7.4， 搅拌转速140～160r/min， 培养时间7 天， 发酵结束； ④将链霉菌属和可可链霉菌可可亚种发酵液按照1～3:1～3进行混合， 即获得复合放 线菌发酵 液。 5.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述复合霉菌发 酵液采用长枝木霉和米根霉按以下步骤进行培 养： ①固体平板活化： 取出长枝木霉保藏管， 用PDA固体培养基划平板进行活化， 25～27℃ 培养3～5天； 取出米根霉保藏管， 用PDA固体培养基划平板进行活化， 27～30℃， 培养3～5 天； ②制备一级种子液： 从固体培养基上分别挑取适量长枝木霉和米根霉单菌落分别接入 到装有PDA固体培养基的茄形瓶中， 25～30℃振荡培养5～7天； 待菌苔长满茄形瓶， 用无菌 生理盐水洗脱孢子； 分别获得长枝木霉和米根霉一级种子液； ③将长枝木霉和米根霉一级种子液分别接入到液体发酵培养基中， 发酵条件为： 温度 27～30℃， pH自然， 搅拌转速140～16 0r/min， 培养时间3天， 发酵 结束； ④将长枝木霉和米根霉发酵 液按照1～3:1～3进行混合， 即获得复合霉菌发酵 液。 6.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述纤维素酶活 ≥1500IU； 蛋白酶活≥20 000IU； 脂肪酶活≥10 000IU； 淀粉酶活≥20 000IU。 7.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述的植物精油 为薄荷、 茉莉、 菊花、 柠檬 任意一种或多种的提取物。 8.根据权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂， 其特征在于， 所述增溶剂为槐 糖脂。 9.一种权利要求1所述的生活垃圾除臭用复合生物制 剂的制备方法， 其特征在于， 包括 以下步骤： (1)将乳酸菌、 酵母菌、 放线菌和霉菌分别进行 单独培养， 得到各菌的复合发酵 液； (2)将乳酸菌发酵液、 酵母菌发酵液、 放线菌发酵液和霉菌发酵液按照配方量进行复 配， 得到复合 微生物发酵 液； (3)将复合微生物发酵液、 复合酶、 植物提取物、 增溶剂按照 配方量混合， 即可得到所述 生活垃圾除臭用复合 微生物制剂。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115181697 A 3