(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210959967.7 (22)申请日 2022.08.11 (71)申请人 马鞍山盘石生物技 术有限公司 地址 243000 安徽省马鞍山市花 山区绿意 创意产业园5 栋302 (72)发明人 袁斌　邵秀芳　李翚　吴秀俊　 吴守峰　刘庭府　邢佳　 (74)专利代理 机构 北京汇捷知识产权代理事务 所(普通合伙) 11531 专利代理师 王文娇 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01) A01G 7/06(2006.01)A01G 13/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 短小芽孢杆菌LYMC-3和其发酵液的新应用 及其发酵液的制备方法 (57)摘要 本发明涉及培养 设备技术领域， 具体涉及一 种短小芽孢杆菌LYMC ‑3和其发酵液的新应用及 其发酵液的制备方法； 短小芽孢杆菌LYMC ‑3和其 发酵液均在防治菊花根腐病中的应用。 其中， 通 过对短小芽孢杆菌LYMC ‑3菌株对菊花根腐病室 内活性测定试验中， 在0.5、 0.8、 1.0 ×l0*12cfu/ mL剂量下， 病原菌抑制率可达72～93％， 显示出 优异的活性。 证明短小芽孢杆菌LYMC ‑3菌株可有 效防治菊花根腐病的危害， 从而能够减少化学农 药对菊花根腐病的使用， 实现对环境更好地保 护。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115261278 A 2022.11.01 CN 115261278 A 1.一种短小芽孢杆菌LYMC ‑3， 其特征在于， 所述短小芽孢杆菌LYMC ‑3的应用于菊花根 腐病的防治。 2.一种根据权利要求1的短小芽孢杆菌LYMC ‑3的发酵液， 其特征在于， 所述发酵液应用 于菊花根腐病的防治。 3.一种根据权利要求2的短小芽孢杆菌LYMC ‑3的发酵液的制备方法， 其特征在于， 包括 以下步骤： 将保存于牛肉膏蛋白胨固体培养基上的短小芽孢杆菌LYMC ‑3接入含牛肉膏蛋白胨液 体培养基50mL的三角瓶中， 于28℃和无光照条件 下以200r/min转速摇培； 将摇培2d， 取得发 酵液后， 经4℃、 10000r/m冷冻 离心20min， 得到发酵上清液， 用0.22 μm的细菌过滤器过滤即 得无菌滤液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261278 A 2短小芽孢杆菌LYMC ‑3和其发酵液的新应用及其发酵液的制备 方法 技术领域 [0001]本发明涉及微生物技术领域， 具体涉及短小芽孢杆菌LYMC ‑3和其发酵液的新应用 及其发酵 液的制备 方法。 背景技术 [0002]菊花根腐病是菊花常见的一种病害， 主要危害菊花根部。 菊花根腐病表现症状为 呈干腐状或乱麻状， 叶片枯黄凋萎， 多发生在开花前后。 菊花根腐病的病因是植株根部聚集 大量菌丝， 引起局部或全部腐烂， 茎叶发黄、 枯萎。 发病主要原因是土质粘重， 通透性不强， 盆底窝水， 病菌大量繁殖 所致。 [0003]近年来， 在菊花根腐病的防治上， 大量使用化学农药， 虽然能够减轻一些菊花病害 的发生， 但给自身及生态环境带来了许多负面影响， 如环境污染加剧， 土壤及作物农药残留 严重， 病菌抗药性的产生加快， 严重威胁着人们的生命财产安全。 [0004]目前， 短小芽孢 杆菌(Bacillus  pumilus)是常见的生防微生物， 具有生物防治， 生 物降解以及促进植物生长等多种功能。 短小芽孢杆菌可以防治多种植物病害， 如 对稻瘟病、 鹰嘴豆根腐病、 黄瓜枯萎病及棉花黄萎病等 都具有显著的防治效果。 因此在农业生产中， 利 用生物菌芽孢杆菌的生物菌剂代替化学农药和杀菌剂的作用有非常广阔的前景， 既能对植 物病虫害的发生起抑制作用， 很大程度上又维持了生态系统的稳定， 还对人类健康和环境 副作用小。 [0005]然而， 菊花根腐病是菊花生产上常见的病害， 危害非常严重， 迫切需要新型生物防 治药剂进行防治。 发明内容 [0006]针对现有技术存在的不足， 本发明提出一种短小芽孢杆菌LYMC ‑3和其发酵液的新 应用及其发酵液 的制备方法， 以解决在菊花根腐病的防治上， 通过化学农药防治菊花根腐 病， 化学农药容 易对环境造成污染的问题。 [0007]为达到上述目的， 本 发明采用如下技术方案： 一种短小芽孢杆菌LYMC ‑3， 所述短小 芽孢杆菌LY MC‑3的应用于 菊花根腐病的防治。 [0008]本发明还提供一种以上的短小芽孢杆菌LYMC ‑3的发酵液， 所述发酵液应用于菊花 根腐病的防治。 [0009]本发明还提供一种以上的短小芽孢杆菌LYMC ‑3的发酵液的制备方法， 包括以下步 骤： [0010]将保存于牛肉膏蛋白胨固体培养基上的短小芽孢杆菌LYMC ‑3接入含牛肉膏蛋白 胨液体培养基50mL的三角瓶中， 于28℃和无光照条件下以200r/min转速摇培； 将摇培2d， 取 得发酵液后， 经4℃、 10000r/m冷冻离心20min， 得到发酵上清液， 用0.22 μm的细菌过滤器过 滤即得无菌滤液。说　明　书 1/4 页 3 CN 115261278 A 3