(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210662462.4 (22)申请日 2022.06.13 (83)生物保 藏信息 GDMCC NO： 62438 202 2.04.27 (71)申请人 北京大学深圳研究生院 地址 518055 广东省深圳市南 山区西丽 街 道深圳大 学城北大园区H栋208室 (72)发明人 王前　徐期勇　白新月　苗前名　 王新炜　 (74)专利代理 机构 深圳中细软知识产权代理有 限公司 4 4528 专利代理师 田丽丽 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) B01D 29/01(2006.01)A01N 63/20(2020.01) A01P 1/00(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 群体感应猝灭菌及其培养方法、 填埋场渗滤 液导排系统生物结垢防治方法 (57)摘要 本发明公开了一种群体感应猝灭菌及其培 养方法、 填埋场渗滤液导排系统生物结垢防治 方 法， 群体感应猝灭菌的培养方法包括以下过程： 提取填埋场渗滤液中和/或填埋场渗滤液导排系 统中的过滤构 件上的细菌群， 将细菌群 分散于溶 液中， 得到接种液； 配置基本培养基， 基本培养基 以C6‑HSL和/或C8‑HSL作为唯一碳源和氮源； 将 接种液置于基本培养基中进行培养， 分离出具有 分解C6‑HSL和/或C8‑HSL能力的备选细菌； 对备 选细菌进行纯化。 本发明得到的群体感应猝灭菌 具有较好的C6‑HSL和/或C8‑HSL降解能力， 可以 有效降解填埋场土工布上或渗滤液中的菌群的 信号分子并产生群体淬灭效果， 避免因微生物聚 集而形成的生物结垢， 进而缓解实际填埋场中因 土工布结垢 而产生的填 埋场下部淤堵现象。 权利要求书2页 说明书5页 附图1页 CN 115161228 A 2022.10.11 CN 115161228 A 1.一种群 体感应猝灭菌， 其保藏编号 为： GDMCC No： 62438。 2.一种群 体感应猝灭菌的培 养方法， 其特 征在于， 包括以下 过程： 提取填埋场渗滤液中和/或填埋场渗滤液导排系统中的过滤构件上的细菌群， 将所述 细菌群分散 于溶液中， 得到 接种液； 配置基本培养基， 所述基本培养基包括己酰基 ‑L‑高丝氨酸内酯信号分子和/或辛酰 基‑L‑高丝氨酸内酯信号分子， 所述基本培养基以所述己酰基 ‑L‑高丝氨酸内酯信号分子 和/或所述 辛酰基‑L‑高丝氨酸内酯信号分子作为唯一 碳源和氮源； 将所述接种液置于所述基本培养基中进行培养， 分离出具有分解所述己酰基 ‑L‑高丝 氨酸内酯信号分子和/或所述 辛酰基‑L‑高丝氨酸内酯信号分子能力的备选细菌； 对所述备选细菌进行 纯化， 得到所述群 体感应猝灭菌 。 3.根据权利要求2所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所述己酰基 ‑L‑高 丝氨酸内酯信号分子和/或所述辛酰基 ‑L‑高丝氨酸内酯信号分子在所述基本培养基中的 浓度为2mM～3mM 。 4.根据权利要求3所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所述基本培养基还 包括0.8g/L～1.2g/L的NaCl、 0.4g/L～0.6g/L的KCl、 0.3 g/L～0.5 g/L的MgCl2、 0.08g/L～ 0.12g/L的CaCl2、 0.12g/L～0.18g/L的Na2SO4、 1.6g/L～2.4g/L的KH2PO4和1.8g/L～2.7g/L 的Na2HPO4。 5.根据权利要求2～4中任意一项所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所 述将所述接种液置于所述基本培养基中进行培养， 分离出具有分解所述己酰基 ‑L‑高丝氨 酸内酯信号分子和/或所述辛酰基 ‑L‑高丝氨酸内酯信号分子能力的备选细菌， 包括以下过 程： 将所述接种液置于所述基本培养基中， 在30℃～40℃下， 以120rpm～180rpm的震荡速 度， 恒温震荡培养3天～7天后， 按体积比取20％～30％样本转移到新的所述基本培养基中， 重复执行前述培养过程2次～4次， 得到包 含高浓度所述备选细菌的菌液。 6.根据权利要求5所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所述对所述备选细 菌进行纯化， 得到所述群 体感应猝灭菌， 包括以下 过程： 将稀释后的所述菌液涂布于LB琼脂培养基上， 于30℃～40℃温度下， 进行倒扣培养24h ～48h， 挑选得到单菌落； 将所述单菌落进行平板划线分离纯化， 得到所述群 体感应猝灭菌 。 7.根据权利要求2～4中任意一项所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所 述提取填埋场渗滤液中和/或填埋场渗滤液导排系统中的过滤构件上 的细菌群， 包括以下 过程： 用PBS缓冲溶液分散所述填埋场渗滤液和/或所述填埋场渗滤液导排系统中的过滤构 件， 所述细菌群分散 于所述PBS缓冲溶 液中， 得到混合液， 从所述混合液中提取 所述细菌群。 8.根据权利要求2～4中任意一项所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所 述溶液为PBS缓冲溶 液。 9.根据权利要求2所述的群体感应猝灭菌的培养方法， 其特征在于， 所述群体感应猝灭 菌的保藏编号 为： GDMCC No： 62438。 10.一种填埋场渗滤液导排系统生物结垢防治方法， 其特征在于， 包括以下过程： 用如权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115161228 A 2权利要求1所述的群体感应猝灭菌或如权利要求2～9中任意一项 所述的培养方法得到的群 体感应猝灭菌降解 填埋场中的细菌群。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115161228 A 3