(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210835029.6 (22)申请日 2022.07.15 (83)生物保 藏信息 GDMCC NO.62173 2021.12.3 0 (71)申请人 广西科学院 地址 530006 广西壮 族自治区南宁市西乡 塘区大岭路98号 (72)发明人 周礼芹　王小虎　朱绮霞　叶柳健　 何双　韦圣博　 (74)专利代理 机构 广西中知华誉知识产权代理 有限公司 45140 专利代理师 梁秀新 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 9/10(2006.01)C12N 9/16(2006.01) A23B 7/155(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 解淀粉芽孢杆菌 菌株A9及其应用 (57)摘要 本发明涉及微生物 技术领域， 特别涉及解淀 粉芽孢杆菌菌株A9及其应用， 本发明的解淀粉芽 孢杆菌菌株对细菌具有良好的抑制作用， 对发酵 产物利用蛋白分离柱Super dextm7510/300GL进 行蛋白分离， 在1号峰获得对青霉菌具有抑菌作 用的γ‑谷氨酰转移酶、 在5号峰获得大肠杆菌对 有良好的抑菌作用的甘油磷酸二酯 磷酸二酯酶； 对该代谢产物进行进一步的应用研究， 实验结果 表明， 1号峰获得的γ ‑谷氨酰转移酶在食品保鲜 方面有良好的抑菌效果。 权利要求书1页 说明书6页 附图7页 CN 115247141 A 2022.10.28 CN 115247141 A 1.菌株Bacillus  amyloliquefaciens  A9， 其特征在于， 所述菌株的保藏编号为GDMCC   NO.62173 。 2.如权利要求1所述的菌株Baci llus amyloliquefaciens  A9的次级代谢产物。 3.具 有 抑菌活 性的 蛋白 酶 ， 其特 征 在于 ， 所 述蛋白 酶由 菌株 Ba cil l us   amyloliquefaciens  A9分泌获得， 所述菌株A 9的保藏编号 为GDMCC NO.62173 。 4.根据权利要求3所述具有抑菌活性的蛋白酶， 其特征在于， 所述蛋白酶为γ ‑谷氨酰 转移酶； 所述γ ‑谷氨酰转移酶抑制青 霉生长。 5.根据权利要求3所述具有抑菌活性的蛋白酶， 其特征在于， 所述蛋白酶为甘油磷酸二 酯酶； 所述甘油磷酸 二酯酶抑制大肠杆菌生长 。 6.如权利要求3所述具有抑菌活性的蛋白酶在水果保鲜上的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于， 所述水果 为橙子。 8.制备如权利要求3所述具有抑菌活性的蛋白酶的方法， 其特征在于， 所述方法为： 将 菌株Bacillus  amyloliquefaciens  A9在LB培养基培养上培养、 离心、 取上清液， 进行冷冻 干燥， 然后经过甲醇抽提， 经过蛋白分离柱Superdextm7510/300GL进行分离纯化， 回收1号 峰和5号峰获得 具有抑菌活性的蛋白酶。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115247141 A 2解淀粉芽孢杆菌 菌株A9及其应用 【技术领域】 [0001]本发明涉及微 生物技术领域， 特别涉及解淀粉芽孢杆菌 菌株A9及其应用。 【背景技术】 [0002]解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens)为芽孢杆菌属， 与枯草芽孢杆菌 (Bacillus  subtilis)亲缘性很高， 其在生长过程中可以产生一系列能够抑制细菌或真菌 的代谢产物， 但是目前对于该代谢产物的研究比较宽泛， 并没有深入研究具体抑菌的是那 种成分。 [0003]虽然， 目前有解淀粉芽孢杆菌可产生抑菌活性物质的报道， 但是经过研究发现， 不 同的解淀粉芽孢 杆菌的发酵产 物中抑菌物质的成分非常 复杂， 而且不同的成分对不同细菌 有不同的抑菌效果； 很难区分是哪种物质对相应的细菌具有相应的抑制作用； 而且， 也并非 所有的解淀粉芽孢杆菌对所有细菌都具有抑菌作用。 [0004]由于解淀粉芽孢杆菌的发酵产物含量较低， 粗提的发酵产物往往很难发挥其抑 菌 的功效， 为此， 有必要对发酵产物进行进一步的深入研究， 得出具体的抑菌物质， 并对抑菌 物质进行富集， 获得更高效的抑菌成为， 为后期应用于医疗、 保健、 食品加工等领域提供更 高效的产品， 对抑菌物质进行高效利用。 【发明内容】 [0005]鉴于上述内容， 有必要对解淀粉芽孢杆菌 的发酵产物进行深入研究， 研究抑菌机 理， 能对解淀粉芽孢杆菌的抑菌物质进行高效利用， 发酵并富集获得具有高抑菌效果的抑 菌物质。 [0006]为达到上述目的， 本发明所采用的技 术方案是： [0007]菌株Baci llus amyloliquefaciens  A9， 所述菌株的保藏编号 为GDMCC NO.62173 。 [0008]本发明还 包括所述的菌株Baci llus amyloliquefaciens  A9的次级代谢产物。 [0009]本发明还包括具有抑菌活性的蛋白酶 ， 所述蛋白酶由菌株Bacillus   amyloliquefaciens  A9分泌获得， 所述菌株A 9的保藏编号 为GDMCC NO.62173 。 [0010]进一步的， 所述蛋白酶为γ ‑谷氨酰转移酶； 所述γ ‑谷氨酰转移酶抑制青 霉生长。 [0011]进一步的， 所述蛋白酶为甘油磷酸二酯酶； 所述甘油磷酸二酯酶抑制 大肠杆菌生 长。 [0012]本发明还 包括所述具有抑菌活性的蛋白酶在水果保鲜上的应用。 [0013]进一步的， 所述水果 为橙子。 [0014]本发明还包括制备所述具有抑菌活性的蛋白酶的方法， 所述方法为： 将菌株 Bacillus  amyloliquefacien s A9在LB培养基培养上培养、 离心、 取上清液， 进行冷冻干燥， 然后经过甲醇抽提， 经过蛋 白分离柱Superdextm7510/300GL进行分离纯化， 回收1号峰和5 号峰获得 具有抑菌活性的蛋白酶。 [0015]本发明具有如下有益效果：说　明　书 1/6 页 3 CN 115247141 A 3