(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210977279.3 (22)申请日 2022.08.15 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24634 2022.04.01 (71)申请人 河南农业大 学 地址 450000 河南省郑州市金 水区文化路 95号 (72)发明人 张涛　申顺善　朴凤植　杜南山　 董韩　刘东平　马肖静　 (74)专利代理 机构 郑州德勤知识产权代理有限 公司 41128 专利代理师 王莉 (51)Int.Cl. A01N 57/12(2006.01) A01N 65/12(2009.01)A01N 59/02(2006.01) A01N 63/25(2020.01) A01P 3/00(2006.01) A01G 13/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) (54)发明名称 防治瓜类叶部病害的生物制剂及其制备和 使用方法 (57)摘要 本发明提供一种防治瓜类叶部病害的生物 制剂， 其成分分别包括大豆卵磷脂、 葵花油、 蒸馏 水、 硫磺和多粘类芽孢杆菌菌悬液。 多粘类芽孢 杆菌菌悬液是由多粘类芽孢杆菌的菌体分散于 无菌缓冲溶液制得的； 所述多粘类芽孢杆菌为 “多粘类芽孢杆菌 Paenibacillus  polymyxa  Pp‑ HK11‑9”， 于2022年04月01日保藏于 “中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心 ”， 保藏编 号为“CGMCC No.24634。 该类生物制剂 能有效防 治瓜类白粉病、 霜霉病和棒孢叶斑病等瓜类蔬菜 叶部病害 且防治过程无公害、 绿 色、 环保。 权利要求书1页 说明书10页 附图5页 CN 115191441 A 2022.10.18 CN 115191441 A 1.一种防治瓜类叶部病害的生物制剂， 其特征在于， 包括卵磷脂、 葵花油和蒸馏水， 其 中卵磷脂、 葵花油、 蒸馏水的质量比为 （3～10） : （10～5 0） : （30～100） 。 2.根据权利要求1所述的防治瓜类叶部病 害的生物制 剂， 其特征在于， 还包括硫磺悬浮 剂， 其中卵磷脂、 葵花油、 蒸馏水、 硫磺悬浮剂的质量比为 （3～10） : （10～50） : （30～100） : （0.01～0.1） 。 3.根据权利要求2所述的防治瓜类叶部病 害的生物制 剂， 其特征在于， 还包括多粘类芽 孢杆菌菌悬液， 所述多粘类芽孢 杆菌菌悬液是由多粘类芽孢 杆菌的菌体分散于无菌缓冲溶 液制得的， 且所述多粘类芽孢杆菌的浓度为 （4～6） ×108 CFU/mL； 所述多粘类芽孢杆菌为 “多粘类芽孢杆菌Pp ‑HK11‑9”， 保藏编号 为 “CGMCC No.24634”。 4.根据权利要求3所述的防治瓜类叶部病 害的生物制 剂， 其特征在于， 所述多粘类芽孢 杆菌菌悬液与由所述卵磷脂、 所述葵花油、 所述蒸馏水、 所述硫磺悬浮剂组成的预混料的体 积比为1： （5～15） 。 5.根据权利要求4所述的防治瓜类叶部病 害的生物制 剂， 其特征在于， 所述无菌缓冲 溶 液的配方为： 甘油  0.01 mL～0.1 mL， (NH4)2SO4 0.01 g～0.1 g， K2HPO4 0.07 g～0.1 g， KH2PO4 0.02 g～0.1 g， MgSO4 0.001 g～0.01 g， 蒸馏水10 00 mL。 6.一种防治瓜类叶部病害的生物制剂的制备方法， 包括以下步骤： 按照卵磷脂、 葵花 油、 蒸馏水、 硫磺悬浮剂的质量比为 （3～10） : （10～50） : （30～100） : （0.01～0.1） 分别称取 原料， 然后进行混合、 粉碎后得到防治瓜 类叶部病害的生物制剂。 7.一种防治瓜类叶部病害的生物制剂的制备方法， 包括以下步骤： 按照卵磷脂、 葵花 油、 蒸馏水、 硫磺悬浮剂的质量比为 （3～10） : （10～50） : （30～100） : （0.01～0.1） 分别称取 原料， 进行混合后得到预混料， 然后以体积比为 （5～15） :  1的比例向所述预混料中添加多 粘类芽孢杆菌菌悬液， 得到防治瓜类叶部病害的生物制剂， 其中， 所述多粘类芽孢杆菌菌悬 液是由多粘类芽孢杆菌的菌体分散于无菌缓冲溶液制得的， 且所述多粘类芽孢杆菌的浓度 为 （4～6） ×108 CFU/mL； 所述多粘类芽孢杆菌为 “多粘类芽孢杆菌Pp ‑HK11‑9”， 保藏编号为   “CGMCC No.24634”。 8.根据权利要求7所述的制备方法， 其特征在于， 所述多粘类芽孢杆菌菌悬液与由所述 卵磷脂、 所述葵花油、 所述蒸馏水、 所述硫磺悬浮剂组成的预混料的体积比为1： （5～15） 。 9.根据权利要求8所述的制备方法， 其特征在于， 所述无菌缓冲溶液的配方为： 甘油   0.01 mL～0.1 mL， (NH4)2SO4 0.01 g～0.1 g， K2HPO4 0.07 g～0.1 g， KH2PO4 0.02 g～0.1  g， MgSO4 0.001 g～0.01 g， 蒸馏水10 00 mL。 10.一种权利要求1～5任一项所述的防治瓜类叶部病害的生物制剂的使用方法， 其步 骤包括： 将所述防治瓜类叶部病害的生物制剂稀释100～200倍后进行叶面 喷雾处理； 在瓜 类叶部病害发病初期时， 每隔7天喷雾一次， 共喷3～ 4次； 在瓜类叶部病害发病严重时， 每隔 4天喷雾一次， 共喷4～5次。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115191441 A 2防治瓜类叶部病害的生物制剂及其制备和使用方 法 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域， 涉及一种防治瓜类叶部病害的生物制剂及其制备和 使用方法。 背景技术 [0002]蔬菜的种类和品种多种多样， 其中瓜类是大宗蔬菜， 瓜类蔬菜包括黄瓜、 丝瓜、 南 瓜、 西葫芦、 冬瓜、 苦瓜等。 随着蔬菜栽培面积不 断扩大， 蔬菜复种指数增加， 瓜类蔬菜病害 十分严重， 其中瓜类蔬菜叶部常见的病害主要有霜霉病、 白粉病、 棒孢叶斑病和细菌性角斑 病等。 [0003]瓜类白粉病在 瓜类自幼苗到成株期均可发病， 主要危害叶片， 也危害叶柄和茎。 白 粉病病一旦 发生， 扩展蔓延 很快， 给生产造成巨大损失。 瓜类霜霉病由假菌界霜霉菌引起的 一种世界性病害， 在瓜类整个生育期均可危害， 以成株期为重， 主要为害叶片。 霜霉病流行 速度快， 一两周内即可使除顶端嫩叶外的其他所有叶片枯死， 减产高达30％～50％。 棒孢叶 斑病又称褐斑病， 由真菌界棒孢属的真菌引起的常见 的病害， 近期在瓜类作物生产中危害 加重， 造成严重损失。 [0004]这些瓜类作物叶部病害的防治目前主要是采用化学药剂， 但长期在大范围施用化 学农药， 会造成环境污染、 农药残留、 以及使病原物产生抗药性， 降低药剂防效等， 严重影响 了瓜类产量和品质且不利于可持续发展。 [0005]目前， 利用生物制剂来防治病虫害， 已成为无公害绿色农业可持续发展的趋势， 但 现有的生物制剂通常存在抑菌谱窄、 农业大田施用防治率不高的缺陷， 致使还没有出现可 以同时防治瓜 类白粉病 、 霜霉病和棒孢叶斑病的生物制剂。 发明内容 [0006]有鉴于此， 本发明提供一种防治瓜类叶部病害的生物制剂及其制 备和使用方法， 以解决上述问题。 [0007]本发明提供一种防治瓜类叶部病害的生物制剂， 包括卵磷脂、 葵花油和蒸馏水， 其 中卵磷脂、 葵花油、 蒸馏水的质量比为(3～10):(10～5 0):(30～100)。 [0008]如图1和图2所示， 由于葵花油和蒸馏水是不相溶的， 所以， 当不加卵磷脂时， 蒸馏 水中的葵花油粒比较大不均匀， 很快产生分层， 如图2B所示。 当添加卵磷脂时， 水中的葵花 油粒比较小、 均匀， 至少保存6个月都不会产生离层， 如图2A所示。 因此， 当卵磷脂、 葵花油、 蒸馏水的质量比为(3～10):(10～50):(30～100)时， 葵花油和 蒸馏水的亲和力比较好， 葵 花油粒大小约为5～10微米， 比较均匀， 保存长时间也 不会产生离层。 [0009]基于上述， 所述的防治瓜类叶部病害的生物制剂还包括硫磺悬浮剂， 其中卵磷脂、 葵花油、 蒸馏水、 硫磺悬浮剂的质量比为(3～10):(10～5 0):(30～100):(0.01～0.1)。 [0010]基于上述， 所述防治瓜类叶部病害的生物制剂， 还包括多粘类芽孢杆菌菌悬液， 所 述多粘类芽孢杆菌菌悬液是由多粘类芽孢杆菌的菌体分散于无菌缓冲溶液制得的， 且所述说　明　书 1/10 页 3 CN 115191441 A 3