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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210654544.4 (22)申请日 2022.06.10 (71)申请人 深圳海关食品检验检疫技 术中心 地址 518000 广东省深圳市福田区福田街 道福强路101 1号 申请人 深圳市检验检疫科 学研究院 (72)发明人 吕敬章 马淑棉 牛娜 黄欣迪  黄一平 刘莹 刘慧玲  (74)专利代理 机构 深圳市瑞方达知识产权事务 所(普通合伙) 44314 专利代理师 张秋红 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12R 1/42(2006.01) (54)发明名称 香辛料中沙门 氏菌的增菌培养基及其制备 方法、 增菌方法 (57)摘要 本发明公开了一种香辛料中沙门 氏菌的增 菌培养基及其制备方法、 增菌方法, 增菌培养基 以增菌培养基总体积为1L计, 包括: 15~19g胰蛋 白胨、 3~8g氯化钠、 1~5g大豆蛋白胨、 0.5~ 4.5g磷酸氢二钠、 0.5~4.5g葡萄糖、 10~50mL不 含抑菌成分的液体油脂、 8~12g抗氧化剂, 其余 为水; 制备方法: 将胰蛋白胨、 氯化钠、 大豆蛋白 胨、 磷酸氢二钠、 葡萄糖、 不含抑菌成分的液体油 脂、 抗氧化剂加入水中, 搅拌加热溶解, 经过 灭菌 后得到增菌培养基; 增菌方法: 包括增菌培养基 制备和增菌培养。 本发明的改良沙门氏菌的增菌 培养基, 可促使香辛料中沙门氏菌有效地增殖和 生长从而被 检出。 权利要求书1页 说明书7页 附图1页 CN 115109722 A 2022.09.27 CN 115109722 A 1.一种香辛料中沙门氏菌的增菌培养基, 其特征在于, 以增菌培养基总体积为1L计, 其 包括以下组分: 15~19g胰蛋白胨、 3~8g氯化钠、 1~5g大豆蛋白胨、 0.5~4.5g磷酸氢二钠、 0.5~4.5g葡萄糖、 10~5 0mL不含抑菌成分的液体油脂、 8~12g抗氧化剂, 其 余为水。 2.根据权利要求1所述的香辛料中沙门氏菌的增菌培养基, 其特征在于, 所述不含抑菌 成分的液体油脂为色拉油、 玉米油或大豆油。 3.根据权利要求1所述的香辛料中沙门氏菌的增菌培养基, 其特征在于, 所述抗氧化剂 为丙酮酸钠、 3,3' ‑二硫代二丙酸、 维生素C或维生素E 。 4.一种香辛料中沙门氏菌的增菌培养基的制备方法, 其特征在于, 以增菌培养基总体 积为1L计, 将15~19g胰蛋白胨、 3~8g氯化钠、 1~5g大豆蛋白胨、 0.5~4.5g磷酸氢二钠、 0.5~4.5g葡萄糖、 10~50mL不含抑菌成分的液体油脂、 8~12g抗氧化剂加入水中至总体积 为1L, 搅拌加热 溶解, 经过灭菌后得到增菌 培养基。 5.根据权利要求4所述的香辛料中沙门氏菌的增菌培养基的制备方法, 其特征在于, 所 述培养基的灭菌 压力为10 3~137kPa, 灭菌温度为1 10~130℃, 灭菌时间为10~ 20min。 6.根据权利要求4所述的香辛料中沙门氏菌的增菌培养基的制备方法, 其特征在于, 所 述增菌培养基在灭菌后的pH值 为7.1~7.5 。 7.一种香 辛料中沙门氏菌的增菌方法, 其特 征在于, 包括以下步骤: S1、 增菌培养基制备: 以增菌培养基总体积为1L计, 将15~19g胰蛋白胨、 3~8g氯化钠、 1~5g大豆蛋 白胨、 0.5~4.5g磷酸氢二钠、 0.5~4.5g葡萄糖、 10~50mL不含抑菌成分的液 体油脂、 8~12g抗氧化剂加入水中至总体积为1L, 搅拌加热溶解, 在103~137kPa、 110~130 ℃下灭菌10~ 20min, 得到pH值 为7.1~7.5的增菌 培养基; S2、 增菌培养: 将香辛料加入盛有所述步骤S1中的增菌培养基的无菌袋中, 均质后进行 增菌培养; 香辛料与增菌 培养基的体积比为1:(7~12)。 8.根据权利要求7所述的香辛料中沙门氏菌的增菌方法, 其特征在于, 所述步骤S2中的 均质时间为1~ 2min。 9.根据权利要求7所述的香辛料中沙门氏菌的增菌方法, 其特征在于, 所述步骤S2中的 增菌培养的温度为34~38℃, 时间为16~ 20h。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115109722 A 2香辛料中沙门氏菌的增菌培养基 及其制备方 法、 增菌方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 致病菌检测技术领域, 尤其涉及一种香辛料中沙门氏菌的增菌培养基 及其制备 方法、 增菌方法。 背景技术 [0002]香辛料通常被用于食品调色、 增味、 除腥膻, 香辛料也是人们佐餐常用调料。 据报 道, 我国香辛料的产值超过60亿 人民币, 香辛料的安全是食品安全重要问题之一。 沙门氏菌 是一种主要的食源性致病菌, 其导致食物中毒的发病率居前2 位, 香辛料中沙门氏菌的污染 不容忽视。 大量研究表明, 从香辛料 的提取物对微生物具有较强的抑制作用, 其中酚类、 醛 类、 脂肪族化合物等脂溶性较强的物质是香辛料抑菌的主要活性成分。 由于香辛料 的抑菌 作用, 其中的沙门氏菌大很多处于受损状态。 受损的微生物是食品安全的潜在威胁, 因为它 们可能在适当的条件下自我修复和产生毒素, 对人体产生危害, 因此检测受损的微生物对 食品安全至关重要。 [0003]微生物检测需要一个增菌阶段, 以使 目标生物体繁殖生长至可检出的浓度。 在检 测可能存在受损细胞的食品样品时, 增菌条件尤其重要。 因为香辛料中存在的抑菌物, 以及 增菌培养基中的一些成分, 对受损微生物的生长繁殖存在抑制作用。 检测可能存在受损微 生物的香 辛料样品时, 由于受损微 生物不能检出, 导 致假阴性的结果。 [0004]目前, 食品中沙门氏菌的检验首先按1:10的量加入增菌培养基(称取25g食品, 加 入225mL增菌培养基), 促进沙门氏菌的复苏并使其生长到足够的量, 沙门氏菌才能被检出。 但对于香辛料中沙门氏菌的检验存在以下问题: 一是 由于脂溶性物质的抗菌和抑菌作用, 香辛料中的沙门氏菌多处于受损状态, 目前检验沙门氏菌所用的增菌培养基不足以使受损 的沙门氏菌修复和复苏; 二是香辛料中的脂溶性物质持续发挥着抗菌和抑菌作用, 抑制 了 沙门氏菌在增菌 培养基中的生长 。 以上两种情况, 极大地影响了香 辛料中沙门氏菌的检出。 发明内容 [0005]本发明要解决的技术问题在于, 针对香辛料中脂溶性较强的物质影响沙门氏菌的 检验, 提供一种香 辛料中沙门氏菌的增菌 培养基及其制备 方法、 增菌方法。 [0006]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是: 一种香辛料中沙门氏菌的增菌培养 基, 以增菌培养基总 体积为1L计, 其包括以下组分: 15~19g胰 蛋白胨、 3~8g氯化钠、 1~5g 大豆蛋白胨、 0.5~4.5g磷酸氢二钠、 0.5~4.5g葡萄糖、 10~50mL不含抑菌成分的液体油 脂、 8~12g抗氧化剂, 其 余为水。 [0007]优选地, 不含抑菌成分的液体油脂为色拉油、 玉米油或大豆油。 [0008]优选地, 抗氧化剂为丙酮酸钠、 3,3' ‑二硫代二丙酸、 维生素C或维生素E 。 [0009]本发明还提供一种香辛料中沙门氏菌的增菌培养基的制备方法, 以增菌培养基总 体积为1L计, 将15~19g胰蛋白胨、 3~8g氯化钠、 1~5g大豆蛋白胨、 0.5~4.5g磷酸氢二钠、 0.5~4.5g葡萄糖、 10~50mL不含抑菌成分的液体油脂、 8~12g抗氧化剂加入水中至总体积说 明 书 1/7 页 3 CN 115109722 A 3

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专利 香辛料中沙门氏菌的增菌培养基及其制备方法、增菌方法 第 1 页 专利 香辛料中沙门氏菌的增菌培养基及其制备方法、增菌方法 第 2 页 专利 香辛料中沙门氏菌的增菌培养基及其制备方法、增菌方法 第 3 页
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