(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211009090.1 (22)申请日 2022.08.23 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.24942 202 2.05.23 (71)申请人 东北农业大 学 地址 150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区长 江路600号 (72)发明人 张安　顾冉　刘焱　王芮鑫　 (74)专利代理 机构 北京圣州专利代理事务所 (普通合伙) 11818 专利代理师 黄青青 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23L 19/20(2016.01) A23L 33/135(2016.01)C12R 1/25(2006.01) (54)发明名称 高产γ-氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其 应用 (57)摘要 本发明公开了一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸 型植物乳杆菌及其应用， 乳杆菌的菌株号为 NEAUs5‑1， 分类命名为 Lactiplantibacillus   plantarum ， 保藏于中国普通微生物菌种保藏管 理中心， 保藏编号为CGMCC  NO.24942。 本发明采 用上述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳 杆菌及其在制备腌渍黄瓜中的应用， 腌渍黄瓜酸 味适中， 口感柔和， 并且高产γ ‑氨基丁酸， 操作 简单， 方便实现规模化 生产。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 115181708 A 2022.10.14 CN 115181708 A 1.一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌， 乳杆菌的菌株号为NEAUs5 ‑1， 分类命名 为Lactiplantibacillus  plantarum ， 保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心， 保藏编号 为CGMCC NO.24942。 2.根据权利要求1所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌的培养方法， 其特 征在于， 步骤如下： S1、 将植物乳杆菌NEAUs5 ‑1进行活化、 制备种子液， 培 养基为pH =3.0的液体MRS培 养基； S2、 将种子液接入到扩大发酵培 养基中进行扩大培 养； 扩大发酵培养基的组分为蛋白胨10  g/L、 酵母粉5  g/L、 牛肉膏5  g/L、 胡萝卜汁100   ml/L， 并以1  M的NaOH调整培 养基pH为6.2 ‑6.4。 3.根据权利要求1所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌在制备腌渍黄瓜 中的应用。 4.根据权利要求3所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌在制备腌渍黄瓜 中的应用， 其特 征在于： 腌渍 黄瓜为富含γ‑氨基丁酸的黄瓜。 5.根据权利要求1所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的 方法， 其特 征在于， 步骤如下： S1、 选料： 挑选新鲜质嫩、 无病虫害及机 械损伤的新 生乳黄瓜； S2、 清洗： 将选好的乳 黄瓜清洗 干净， 置于发酵容器中； S3、 发酵： 在步骤S2的装有乳黄瓜的发酵容器中注入纯净水， 然后按黄瓜质量分数的2% 添加植物乳杆菌NEAUs5 ‑1菌液， 同时按黄瓜质量分数的2 %添加食用盐； 最后加入芝麻、 苏子 籽、 芥末籽、 胡椒和香叶， 密闭发酵获得腌渍 黄瓜。 6.根据权利要求5所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的 方法， 其特 征在于： 步骤S3中， 发酵温度为20℃， 发酵时间不少于 30天。 7.根据权利要求5所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的 方法， 其特 征在于： 步骤S3中， 在加入 食用盐同时， 还加入按黄瓜质量分数2 %的L‑谷氨酸钠。 8.根据权利要求5所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的 方法， 其特 征在于： 步骤S3中， 在加入 食用盐同时， 还加入按黄瓜质量分数1%的红梅味素。 9.根据权利要求5所述的一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的 方法， 其特征在于： 制备腌渍黄瓜中使用高效液相色谱分析法测定黄瓜、 黄瓜汁中的γ ‑氨 基丁酸含量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115181708 A 2高产γ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及微生物发酵工艺技术领域， 尤其是涉及一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸 型植物乳杆菌及其在制备腌渍 黄瓜中的应用。 背景技术 [0002]黄瓜因营养丰富， 口感清脆， 备受广大消费者的喜爱， 并成为餐桌上常见的蔬菜之 一。 黄瓜可鲜食、 可熟食， 亦可经过浸泡或发酵制备成腌渍黄瓜食用。 酸黄瓜在满足人民生 活需求、 补充淡季蔬菜不足中起着重要作用； 品质优良的酸黄瓜也因入口脆爽、 酸度适中， 常作为饭前开胃小菜。 [0003]目前， 市场售卖的酸黄瓜多数是用白醋浸泡而成， 属于非发酵腌渍品， 导致酸黄瓜 酸味强烈， 口感不够柔和， 口味欠佳； 且其中的微生物发酵不显著， 氨基酸含量低。 为了长期 保存， 还需要在其中添加抗氧化剂和防腐剂等， 对身体造成危害。 经过植物乳杆菌发酵制成 的腌渍黄瓜， 不仅口味纯正， 并且经过发酵所产生的乳酸杆菌素可起到防腐的效果， 同时保 留黄瓜自身所含的大部分营养物质。 [0004]植物乳杆菌对人体具有免疫调节、 抑制致病菌、 降低胆固醇含量、 促进营养物质吸 收和抗癌等作用， 其代谢产生的γ ‑氨基丁酸在人体内是一种重要的中枢神经系统抑制性 神经递质， 在改善睡眠、 缓解焦 虑、 加速新陈代谢等方面 起到了良好的保健作用。 [0005]目前， 已经筛选得到多株产γ ‑氨基丁酸的生产菌， 华东理工大学谢静莉等人 （申 请号： 201510224855.7） 筛选出一株产γ ‑氨基丁酸的乳酸菌， 产量为50mg/L。 黑龙江省乳品 工业技术开发中心姜毓君等人 （申请号： 201110439694.5） 筛选到一株产γ ‑氨基丁酸的植 物乳杆菌NDC75017， 产量为138  mg/L。 广西科技大学贤乾隆分离出两株乳酸菌， 即植物乳杆 菌 （QL‑14） 和干酪乳杆菌 （QL ‑20） ， 加入10g/L谷氨酸钠后可分别 产γ‑氨基丁酸390  mg/L和 584 mg/L， 选用干酪乳杆菌 （QL ‑20） 作为酸奶发酵剂 （添加谷氨酸钠） 后产γ ‑氨基丁酸为 224.2mg/L， 且口感较好。 齐齐哈尔医学院刘韩等人分离出一株嗜热链球菌QYWLYS ‑1可产 γ‑氨基丁酸2910  mg/L （添加谷氨酸钠） ， 同时筛选出一株植物乳杆菌QYW ‑L‑11， γ‑氨基丁 酸产量为1380  mg/L （添加 谷氨酸钠） 。 以上研 究中所获得的γ ‑氨基丁酸能力均不高， 并多 数在含谷氨酸钠条件下获取， 且很少应用于生产中。 所以， 能够筛选出可以高产γ ‑氨基丁 酸的植物乳杆菌对于食品安全和人类健康方面 意义重大。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其在制备腌渍 黄瓜中的应用， 腌渍黄瓜酸味适中， 口感柔和， 并且高产γ ‑氨基丁酸。 在制备腌渍黄瓜时操 作简单， 方便实现规模化 生产。 [0007]为实现上述目的， 本 发明提供了一种高产γ ‑氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌， 乳杆 菌的菌株号为NEAUs5 ‑1， 分类命名为 Lactiplantibacillus  plantarum ， 保藏于中国普通微 生物菌种保藏管理中心， 保藏编号 为CGMCC NO.24942。说　明　书 1/6 页 3 CN 115181708 A 3